Работа № 3. Экспресс-диагностика сифилиса

Методические указания

При массовом обследовании населения используют экспресс-метод обсле­дования на сифилис. Этот метод дает значимый процент ошибки, поэтому все положительные результаты подтверждаются другими серологическими реак­циями (р. Вассермана, осадочные реакции).

Цель: изучить экспресс-метод обследования на сифилис

Самостоятельная работа: поставить и учесть результат экспресс-метода серологического обследования на сифилис.

 

Сыворотки обследуемых
Ингредиенты
1. Инактивированная сыворот­ка больного	З к	З к	З к	З к	З к
2. Эмульсия кардиолипинового антигена	1 к	1 к	1 к	1 к	1 к
Ингредиенты перемешать (или встряхнуть, если реакция в планшете)
3. Физиологиче­ский раствор	1 к	1 к	1 к	1 к	1 к
После выпадения хлопьев, учесть результат

Примечание: для демонстрации дается эталон учета результатов.

 

Положительная реакция (крупные хлопья)	Слабоположительная (хлопья средней величи­ны и мелкие)	Отрицательная (нет хлопьев)
++++ +++	++ +	-

 

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Работа № 4.Серологическая диагностика сифилиса

 

Цель: изучить современные серологические методы диагностики спирохетозов

Методические указания

а) Реакция Вассермана. Реакцию ставят по принципу реакции связывания комплемента. Отличием является то, что при постановке реакции Вассермана может быть использован неспецифический антиген - липидная вытяжка бычье­го сердца. Возможность использования такого антигена объясняется тем, что в сыворотке крови больного повышается содержание глобулинов и изменяется степень их дисперсности. Глобулины, вступая в соединение с липидньми экс­трактами, образуют комплекс, который связывает комплемент, и поэтому гемо­лиз не происходит (в гемолитической системе). Отсутствие гемолиза - положи­тельная реакция - серологически подтверждает диагноз "сифилис". При поста­новке серологических реакций можно использовать специфические антигены из тканевых трепонем и культуральные.

Самостоятельная работа: учесть результат готовой реакции Вассермана, поставленной с целью выявления антител в сыворотке крови больного с подозрением на сифилис. Сделать вывод.

Направление:___________________________________________________________________

Ингредиенты:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

 

Механизм:

 

 

Постановка:

 

 

Аг1 Аг2 Аг3 КС КА КГС

 

Результат:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

б) Реакция иммобилизации спирохет

Методические указания

К тканевым живым трепонемам прибавляют исследуемую сыворотку больного с подозрением на сифилис. Через несколько минут трепонемы теряют способность двигаться. Методика постановки реакции: все пробирки выдерживают в анаэростате при 35⁰С 20 часов, готовят пре­парат "раздавленная капля" и микроскопируют в темном поле зрения. Процент иммобилизованных трепонем определяют по формуле:

х= Тк - То х 100, где

Т_к

Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом)

То - число подвижных трепонем в опыте

Учесть результат опыта при: Тк=30, То=12

Результат: положительный - процент иммобилизации выше 50, отри­цательный - ниже 20, слабо положительный, сомнительный - 30-50, 20-30.

 

Самостоятельная работа: учесть результат реакции иммо­билизации трепонем (РИТ) с целью выявления специфических антител в сыво­ротке крови больного сифилисом. Сделать вывод.

Ингредиенты	Пробирки
	"К"	"К"	"О"
Сыворотка здоро­вого	+	-	-
Сыворотка больно­го	-	+	+
Физ. р-р	+	-	-
Комплемент инактивированный	-	+	-
Комплемент	-	-	+
Живые тканевые трепонемы	+	+	+

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

 

Вывод:______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 6. Принципиальная схема лабораторной диагно­стики сифилиса

Самостоятельная работа: разобрать особенности лабораторной диагностикисифилиса. Отметить наибо­лее информативные методы лабораторной диагностики.

 

Исследуемый материал:

____________________

____________________

____________________

 

Работа № 7.Серологическая диагностика лептоспироза

Задача. В клинику поступил больной с лихорадочным заболеванием на 8-й день болезни. Местность, где проживал больной, неблагополучна по лептоспирозу. У больного была дважды взята кровь - в момент поступления и через неделю - и направлена на исследование для определения специфических антител с диагностикумом L. interrogans в реакции связывания комплемента.

Самостоятельная работа: учесть готовый результат РСК с парными сыворотками обследуемого с подозрением на лептоспироз. Ответить на вопросы:

1) под­твержден ли диагноз лептоспироза?

2) обосновать диагности­ческую значимость проведенного исследования.

 

 

1-й ряд

(8-й день

заболевания)

 

2-й ряд

(15-й день

заболевания)

1/1001/200 1/400 1/800 1/1600 КС КА КГС

Результат: ___________________________________________________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Вывод: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Работа № 8.Серологическая диагностика Лайм-боррелиоза

Задача. В клинику обратился пациент, который 2 недели назад снял с себя клеща. К врачу не обращался. Через неделю после присасывания клеща образовалась кожная эритема. Предварительный диагноз: «клещевой иксодовый боррелиоз». Для подтверждения диагноза была поставлена нРИФ с сывороткой обследуемого и диагностикумом

из боррелий (B.burgdorferi).

Самостоятельная работа: разобрать принцип постановки нРИФ и учесть результат реакции на обнаружение антител в сыворотке пациента с подозрением на Лайм-боррелиоз. Сделать вывод.

 

Механизм:

 

 

Результат: _____________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

 

Вывод: _______________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

Подпись преподавателя ________________________________________________________

Самостоятельная работа студента во внеурочное время:

1. Классифицировать предложенные антимикробные препараты в соответствии с их назначением (профилактические, диагностические, лечебные).

 

1.Вакцина лептоспирозная инактивированная жидкая

2._____________________________________________________________________________

3._____________________________________________________________________________

4._____________________________________________________________________________

5._____________________________________________________________________________

6._____________________________________________________________________________

 

1.Лептоспирозная агглютинирующая сыворотка

2._____________________________________________________________________________

3._____________________________________________________________________________

4._____________________________________________________________________________

5._____________________________________________________________________________

6.____________________________________________________________________________