Основные методы диагностики наследств болезней

Для диагностики наследств болезней используются методы: Клинико-генеалогический, цитогенетический, молекулярно-генетич,биохимический.

62. Клинико-генеалогический метод -один из старых методов изучения генетики человека.Позволяет установить наследст хар-р, тип наследования признака, его пенентрантность, рассчитать риск рождения больного ребенка в семье. Суть метода заключается в выявлении родословных связей и прослеживании признака болезни среди родственников в ряду поколений. Состоит из этапов: сбор сведений, составление родословной,генеалогич анализ.

63. Цитогенетический метод -группа методов, основанных на микроскопическом изучении хромосом человека. Эти методы применяются при диагностике хромосмоных болезней. Наиболее распрост из них –кариотипирование-метод изучения кариотипа, похволяет выявитьь нарушения в числе и стр-ре хромосом. С помощью метода дифференц окрашивания можно изучить характер хромосмоных аббераций и их локализацию по характерному окрашиванию по длине хромосомы. В основном, хромосомы изучаются на стадии метафазы митоза. Для более точного анализа хромосомы можно изучать на стадии прометафазы, когда они еще не полностью спирализованы. Можно различить не только районы и сегменты,но и субсегменты. Это позволяет обнаружить микроперестройки хромосом.

64. Молекулярно-цитогенетическая диагностика является современным направлением в клинической цитогенетике, цель которой – разработка и применение новых высокоэффективных методов анализа хромосомопатий.

Согласно современным представлениям [13], молекулярно-цитогенетическая диагностика с использованием FISH-метода применяется в различных разделах медицинской генетики:

- для определения численных и структурных хромосомных аномалий в клинической цитогенетике;

- для идентификации маркерных (мини-, дополнительных) хромосом;

- для определения анеуплоидий в неделящихся пренатальных и постнатальных интерфазных клетках;

- для определения различных специфических и неспецифических хромосомных аномалий в онкоцитогенетике;

- для анализа хромосомных аномалий в клинической цитогенетике (изохромосомы, сбалансированные хромосомные аномалии при различных клинических картинах синдрома и т.д.);

- для анализа хромосомных аберраций в генетико-токсикологических исследованиях.

65. Биохимические методы – это группа методов позволяющих выявить деффект обмена какого-то вещества путем определения его в крови моче и других жидкостях. Главная задача – в выевлении гетерозиготного носительства патологического гена(метод нагрузки). Применяется для дагностики моногенных болезней. Биохимический метод подразделяют на качественные количественные и полуколичественные.

Качественные реакции определяют повышенные концентрации субстратов блокированный мутантным геном ферментной реакции или их производных накапливающихся при наследственных болезнях обмена.

Полуколичественные и количественные тесты определяют концентрацию тех или инх веществ в моче и крови.

Биохимический экспресс-метод - легкие и быстрые методы диагностики некоторых болезней обмена веществв.

66. Молекулярно-генетические методы – группа методов позволяющие выявить различные вариации в структуре ДНК. Основные этапы:

1. Получение образцов ДНК - источником может быть любые ядросодержащие клетки:лейкоциты периферической крови, хорион, амниотические клетки, культуры фибробластов, соскоб слизистой щеки, несколько волосяных луковиц. Фрагмент ДНК можно размножить с помощью полимеразной цепной реакции. (ПЦР)

2. Рестрикция(разрезания) ДНК на фрагменты с помощью фермента рестриктазы.Разные рестриктазы узнают разные последовательности, т.е. имеют разные сайты рестрикции. Метод полиморфизма длин рестриктных фрагментов (ПДРФ) используется для выявление степени родства ДНК разных организмов

3.Электрофорез фрагментов ДНК – обеспечивает распределение фрагментов на поверхности агарозного полиакриламидного геля в зависимоти от их размера.

4. Виуализация (обнаружение) фрагментов – конечный этап диагностики. Гуль обрабатывается этидия бромидом, который связывется с ДНК.

5. Идентификация фрагментов ДНК – выделение спецефических фрагментов из геля, в настоящее время производится с помощью блот-гибридизации по Саузерну.

67. Прямые методы ДНК – диагностики основана на исследовании мутантного гена. Используется в тех случаях, когда установлен мутантный ген, ответственный за возникновеня наследственного заболевания.

68. Косвенные методы ДНК -диагностики оснавана на анализе сцепления полиморфных участков ДНК у больного и его родственников с мутантным геном.Применяется