Тема: Спиртовое брожение. Обмен галактозы и фруктозы.

Теоретические вопросы:

1. Схема включения фруктозы в процесс гликолиза в печени, сердце, мышцах. Фруктозурия и причины.
2. Схема включение галактозы в процесс гликолиза. Галактоземия, причина.
3. Спиртовое брожение: пируватдекарбоксилазная и алкогольдегидрогеназная реакции.
4. Глюконеогенез - биосинтез глюкозы из неуглеводов
5. а) реакции образования фосфоенолпирувата из пирувата,
6. б) механизм транспорта оксалоацетата из митохондрии в цитоплазму,
7. в) обходные реакции глюконеогенеза с участием специфических ферментов.

8. Контрольная работа по гликолизу, синтезу и распаду гликогена.

 

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА:

1.Количественное определение концентрации глюкозы в крови глюкозооксидазным методом.

ХОД работы: Определение без депротеинирования – без осаждения белков анализируют сыв. и плазму крови, мочу.

Приготовить опытную пробу по след схеме:

 

Компоненты в мл	опытная
Рабочий р-р реактивов	2,0
Исследуемый образец	0,02

 

Перемешать и выдержать в теч. 20 мин. при 37 ⁰С. Через 15 мин после начала

инкубации содержимое пробирки вновь перемешать. Раствор следует предохранять

от прямого действия света. Измерить оптич. плотность раствора опытной пробы против дист.

воды при длине волны 500-560 нм кюветы 0,5см.

Еп

Расчет по формуле: С=--------х 10,0

Ек

Где. Е_П-оптич: плотность исслед. пробы.

Е_К-оптич: плотность калибров. пробы, Ек=0,5

10,0 – сод.глюкозы в ммоль/ л, калибратр

Нормальные величины: в цельной крови, натощак- 3,4- 5,5 ммоль/л

в сыв. плазме - 4,2- 6,1 ммоль/л

 

Литература:

1. Алдашев А.А. и соавт., Биохимия человека, Бишкек, 2013 г стр. 141-171.

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008. стр. 222-254.

3. БерезовТ.Т., Коровкин Б.Ф., Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007, стр. 319-359

4. Николаев А.Я. Биохимия, 1989, стр. 368-379, 2004, стр. 380-386, 404-41

5. Лекции

Занятие-15 пед-2017г

Тема: Аэробный метаболизм пирувата. Цикл Кребса. Челночные механизмы.

Теоретические вопросы:

1.Строение пируватдегидрогеназного мультиферментного комплекса: ферменты и коферменты,

их локализация в клетке.

2. Механизм окислительного декарбоксилирования пирувата, конечные продукты.

3. Цикл Кребса, биологическое значение. Последовательность реакций окисления ацетил-КоА.

Субстратное фосфорилирование в цикле Кребса, его значение.

4. Глицерофосфатный и малатаспартатный челночный механизмы, их биороль.

5. Полный энергетический эффект окисления глюкозы до СО₂ и Н₂О в печени, сердце и

мышцах.

 

Практическая работа:

Качественные реакции на субстраты цикла Кребса.

Ход работы: в пробирку вносят несколько кристаллов лимонной кислоты, во вторую – несколько кристаллов янтарной кислоты /сукцината/ в каждую пробирку + по 1кап. дист. воды, затем в каждую пробирку + по 10-12 кап Н₂SO₄ концентрированной

после чего + несколько кристаллов резорцина, пробирки осторожно нагреть на водяной бане – появляются окрашенные продукты, к охлажденным растворам + по 10кап. дист. воды и наблюдаем флюоресценцию в ультрафиолетовых лучах: лимонная кислота дает голубое свечение, янтарная- зеленое.

 

Литература:

 

1.Алдащев А.А. и соавторы. Биохимия человека, Бишкек, 2013. С.141-171.

2. Комов В.П., Шведова В.Н. Биохимия. – М.: Дрофа, 2008. стр.239-271

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: «Медицина»,

1990,стр. 177-191, 222-267, 2007,стр. 319-359

4. Николаев А.Я. Биологическая химия.- М., 2004, с. 225-234, 1989, стр.232-299

5. Лекции

 

 

Занятие-16 пед- 2017год.

Тема: Глюконеогенез. Пентозофосфатный путь окисления глюкозы -6фосфат.

Лактатный и глюкозоаланиновый циклы. Регуляция и патология углеводного обмена.

1. Пентозо - фосфатный путь окисления глюкозы (реакции окислительной стадии).

Биологическое значение пентозного окисление.

2. Взаимосвязь между процессами гликолиза в мышцах и глюконеогенеза в печени

лактатный и глюкозо – аланиновый циклы, их значение.

3. Регуляция углеводного обмена.

4. Патология углеводного обмена.

5. Контрольная работа по окислению пирувата и ц. Кребса.

 

Практическая работа:

Качественные реакции на пентозы.

 

1. Рибозу / дезоксирибозу / - дифениламин с d- рибозой дает синее окрашивание, а с рибозой -

зеленое

Ход раб:10 кап. раствора пентозы + 20 кап раствора орцина и кипятят в водяной бане в

течение 15 мин.- образуется сине- зеленое окрашивание.

2. Реакция с альфа- нафтолом/

Ход раб: к 10 кап. раствора пентозы + 5кап. 0,2% спиртового раствора альфа - нафтола + 20 кап.

H₂SO₄ конц. (осторожно наслаивать) – появляется розово-фиолетовое

окрашивание (кольцо)