Изучение осмотической резистентности эритроцитов.

Объем и нормальная функция эритроцитов определяется средой, в которой они находятся. Изотонические растворы (например, 0,9% NaCl; 5% глюкозы) имеют одинаковое с эритроцитами осмотическое давление. В них эритроциты сохраняют свою форму. Гипертонические растворы (например, 3% NaCl, 40% глюкозы) имеют большее, чем эритроциты осмотическое давление. Вода из эритроцитов уходит в окружающий раствор, они сморщиваются. Это явление называется ПЛАЗМОЛИЗ. Гипотонические растворы (менее 0,9% NaCl) имеют меньшее, чем в эритроцитах осмотическое давление. Вода из окружающего раствора поступает в эритроциты, они набухают и разрушаются, гемоглобин выходит в окружающий раствор, наступает ГЕМОЛИЗ.

Осмотическая резистентность эритроцитов – устойчивость эритроцитов к действию гипотонических растворов. Выраженные признаки гемолиза у здорового человека начинаются в 0,48% растворе NaCl, в 0,34% растворе разрушаются все эритроциты. В клинической практике определяют стойкость эритроцитов к гипотоническим растворам NaCl. В связи с тем, что различные эритроциты неодинаково устойчивы к одной и той же концентрации гипотонического раствора различают минимальную и максимальную стойкость.

Минимальная стойкость выражает стойкость самых слабых эритроцитов и определяется концентрацией NaCl, в которой они еще не разрушаются. Например: гемолиз отсутствует при 0,6%, 0,5% и 0,45% NaCl, а при концентрации 0,4% NaCl наступает гемолиз. Минимальная стойкость равняется в этом случае 0,45% NaCl.

Максимальная стойкость выражает резистентность наиболее устойчивых эритроцитов и определяется концентрацией NaCl в которой эти эритроциты не разрушены. Например: при 0,35% NaCl имеется неполный гемолиз (часть эритроцитов в осадке), полный гемолиз наступил при 0,3% NaCl. Максимальная стойкость в данном случае равняется 0,35% NaCl.

Границы нормальной стойкости эритроцитов человеческой крови по отношению к гипотоническим растворам NaCl: минимум ― 0,48%, максимум ― 0,32%.

Оснащение: штатив с 14 пробирками, 1% р-р NaCl, дист. вода, пробирка с донорской кровью, 2 пипетки.

Ход работы: Гипотонические растворы готовятся согласно таблице (см. ниже). Затем в каждую пробирку прибавляют одинаковое количество (по капле) дефибринированной крови (0,02 мл) при помощи капилляра от гемометра. При этом капилляр не опускают в раствор, а выдувают кровь из нее на стенку пробирки и взбалтывают кровь. При заполнении всех 14 пробирок их встряхивают и оставляют стоять в течение часа при комнатной температуре. После этого по цвету раствора и по полному гемолизу отмечают минимальную и максимальную осмотическую стойкость эритроцитов.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте пробирки, укажите концентрацию раствора NaCl в каждой пробирке. Отметить в таблице: знаком «−» ― если в осадке имеются эритроциты, а верхний слой не окрашен (отсутствие гемолиза); знаком «+» ― е сли верхний слой окрашен, но еще сохраняется осадок (неполный гемолиз) и знаком «+» ― прозрачная равномерно окрашенная жидкость «лаковая кровь» (полный гемолиз). Указать концентрации NaCl, соответствующие максимальной и минимальной резистентности исследуемой крови и сравнить данные с нормой.

Результаты работы:

Вывод:

АНАЛИЗ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ГЕМОЛИЗА.

Гемолиз - это разрушение эритроцитов, сопровождающееся выходом гемоглобина в раствор (окрашивается в красный цвет и становится прозрачной – «лаковая кровь»). Виды гемолиза: осмотический, химический, биологический, температурный (холодовой, тепловой), механический.

Оснащение: штатив с пятью пробирками, пипетки, физиологический раствор, дистиллированная вода, 0,1%-ный раствор HCl, 5%-ный раствор глюкозы, сапонин, исследуемая донорская кровь.

Ход работы: в штатив ставят 5 пробирок, в каждую из которых наливают по 3 мл соответственно физиологического раствора, дистиллированной воды, 0,1%-ного раствора HCl, 5%-ного раствора глюкозы, раствора сапонина. Во все 5 пробирок вносят пипеткой по 2 капли крови. Рассматривая содержимое всех 5 пробирок, сравнивают результаты.

Рекомендации к оформлению работы: Определите наличие или отсутствие гемолиза в каждой пробирке. Опишите механизм гемолиза в каждой пробирке.

Результаты работы:

Вывод: