Определение токсичности , пирогенности и стерильности лекарственных средств.

Биологическую оценку качества ЛВ проводят по их фармакологической активности или токсичности. Биологические и микробиологические методы применяют в тех случаях, когда с помощью физических, химических и физико-химических методов нельзя сделать заключение о доброкачественности ЛС. Биологические испытании проводят на животных (кошки, собаки, голуби, кролики, лягушки), отдельных изолированных органах (рог матки, часть кожи) и группах клеток (форменные элементы крови, штаммы микроорганизмов). Биологическую активность устанавливают путем сравнения действия испытуемых и стандартных образцов.

- Биологическая оценка сердечных гликозидов в ЛП (основана на их способности вызывать в токсических дозах систолическую остановку сердца животных, определяют ЛЕД, КЕД и ГЕД)

- Биологическая активность антибиотиков (устанавливается по сравнительной оценке угнетения роста микроорганизмов, метод диффузии в агар)

- Биологическая активность инсулина (сравнивают гипогликемическое действие испытуемого инсулина и стандартного образца, на кроликах)

- Испытания на содержание веществ гистаминноподобного действия (последовательное повторное введение животным вначале гистамина, затем испытуемого раствора и контролируют АД, на кошках)

Испытание на пирогенность основано на способности пирогенных веществ повышать температуру тела теплокровных животных. Суть испытания состоит в измерении температуры тела кроликов после введения им в ушную вену испытуемых стерильных жидкостей. Жидкость считают непирогенной, если сумма повышения температуры у трех кроликов не превышает 1,4 С. Если эта сумма находится в пределах 1,5-2,2 С испытание повторяют на 5 кроликах, а если превышает 2,2 С, то жидкость считается пирогенной.

Также применяют ЛАЛ-тест (определение бактериальных эндотоксинов). В основе лежит способность лизата амебоцитов (клеток крови) мечехвоста специфически реагировать с эндотоксинами Гр- бактерий (полисахаридами), в результате взаимодействия появляется помутнение прозрачной реакционной смеси или происходит образование твердого геля, что служит подтверждением присутствия эндотоксина.

Испытание на токсичность проводят на белых мышах. Испытуемый раствор вводят в хвостовую вену 5 мышам и ведут наблюдение за ними в течение 48 часов. Если ни одна из подопытных мышей в течение этого срока не погибнет, то ЛП считается выдержавшим испытание на токсичность. В случае гибели хотя бы 1 мыши испытания повторяют по определенной схеме и делают окончательное заключение о его токсичности.

Испытание на стерильность основано на доказательстве отсутствия в ЛС жизнеспособных микроорганизмов любого вида и является одним из важнейших показателей безопасности ЛС. Эти испытаниям подвергаются все ЛП для парентерального введения, глазные капли, мази и т.д. для контроля стерильности применяют биогликолевую и жидкую среду Сабуро, используя метод прямого посева на питательные среды. Если ЛС обладает выраженным антимикробным действием или разлито в емкости более 100 мл, то используют метод мембранной фильтрации.

Влияние условий хранения на качество ЛС, производных пиримидина, тиазола, изоаллоксазина

Хранение ГЛС должно отвечать требованиям ФС (ФСП). ГЛС хранят в сухом, прохладном, защищенном от света месте, в заводской упаковке, каждый вид ГЛС хранят изолированно от других.

Производные пиримидина, тиазола и изоаллоксазина требуют защиты от воздействия света и кислорода воздуха, чтобы избежать окисления веществ, отличающихся по фармакологической активностью или полностью теряющих ее. Рибофлавин (пр.изоалоксазина) под действием света легко окисляется с образованием неактивных люмихрома и люмифлавина. Обычно для хранения используют темные помещения, светонепроницаемые ящики и шкафы, которые внутри окрашивают черной краской.

Изменения ЛС, производных морфинана при хранении

Во избежание окисления производные морфинана необходимо хранить в хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света, в защищенном от света месте. Это тем более необходимо в связи с тем, что они способны терять кристаллизационную воду.