Навык иммерсионной микроскопии готового препарата.

Навык иммерсионной микроскопии готового препарата.

Поставить малый сухой объектив на расстоянии 5-7 см от предметного столика и с помощью зеркала установить равномерное освещение поля зрения. После нанесения на поверхность препарата небольшой капли иммерсионного масла под контролем глаза сбоку погрузить в нее фронтальную линзу иммерсионного объектива, а затем, глядя в окуляр, при помощи винтов установить препарат в фокусе микроскопа. Микроскопирование необходимо проводить. Не снимая руки с винта, что дает возможность, изменяя фокусное расстояние, рассмотреть всю поверхность поля зрения. После работы иммерсионная система и столик микроскопа должны быть очищены от масла.

Приготовление мазка и окраска простым методом.

На предметное стекло наносится физ.раствор (в случае если культура сама не жидкая!), добавляется культура. Смешивают размером с монетку и высушивают. Фиксируют над пламенем горелки проводя стеклом 5-7 раз с контролем температуры на руке. Добавляется один краситель (любой из представленных: генцианвиолет - 3 мин, фуксин - 3-5 мин, метиленовый синий- 5-7 мин), после выдержки смываем водой, высушиваем и микроскопируем. Метод позволяет увидеть форму и пространственное расположение бактерий.

Приготовление мазка и окраска методом Грама.

Приготовить фиксированный мазок. На поверхность мазка наносят генцианвиолет на 3 мин. Не смывая краски на поверхность наносят раствор Люголя (KI) на 1 мин. Краску смыть и поверхность мазка обработать этиловым спиртом 30 сек. Мазок промыть водой и докрасить фуксином. Мазок промыть водой, высушить и микроскопировать с иммерсией.

Ускоренный метод Полева-Ермольевой.

Делается посев на пептонную воду с pH=9. Через 6-8 часов из этой культуры одновременно делается мазок, реакция с крахмалом, и реакция с О1-сывороткой.

Принцип работы со средой Эндо.

Среда Эндо позволяет отдифференцировать условно-патогенную и сапрофитную кишечную флору, так как в основном сапрофитная флора ферментирует лактозу в отличие от условно-патогенной. Состав: питательные вещества; агар; фуксин, сцепленный с лактозой. Лактозо+ бактерии образуют колонии, принимающие цвет среды (малиновый). Лактозо- бактерии образуют бесцветные колонии на малиновом фоне.

Постановка реакции агглютинации на стекле со смесью ОКА-сывороток.

На предметное стекло наносится капля сыворотку, куда впоследствии добавляется культура. Признаками + реакции являются образование хлопьев и прозрачной капли. Это родовая сыворотка рода Escherichia. После этой реакции следует поставить реакции с монорецепторными сыворотками.

Принцип работы со средой Ресселя.

Засеиваем культуру на скошенную среду Ресселя. Она имеет темно-зеленый цвет. Нижняя часть содержит глюкозу, скошенная часть содержит лактозу. В зависимости от ферментации того или иного сахара через 24 часа у нас могут быть следующие результаты: Л+ кислота – среда желтеет, Л+ кислота и газ – среда желтеет+появляются пузырьки, Л- - без изменений; Г+ кислота – среда желтеет, Г+ кислота и газ - среда желтеет+появляются пузырьки, Г- - без изменений; при выделении сероводорода верхняя точка скошенной части чернеет.

Постановка и значение реакции Видаля.

Реакция Видаля ставится по типу развернутой реакции агглютинации. Позволяет определить по титру реакции вид сальмонеллы и активность инфекционного процесса. Сыворотку крови больного добавляют в несколько пробирок с антигенами, инкубируют 24 часа при 37 ˚С. Результаты записывают в виде титра. Титр – наибольшее разведение сыворотки, при которой происходит положительная реакция агглютинации. Диагностически важными являются титры больше 1:240.

Контроль истинности реакции Видаля.

Существуют 2 контроля истинности реакции Видаля:

1.Ставят повторную реакцию агглютинации с определением титра спустя неделю. При истинной реакции титр увеличивается или остается на высоком уровне. При ложноположительной реакции титр уменьшается или остается на низком уровне.

2.Ставят одновременно реакцию агглютинации на О-антитела и Н-антитела. Если О-антител больше чем Н-антител, то реакция считается истинной. Если же наоборот, то реакция ложноположительная.

Проба Асколи.

Это диагностическая реакция преципитации на антигены сибирской язвы. Используют тканевые экстракты или экстракты измельченного и прокипяченного промышленного сырья и сибиреязвенную сыворотку.

Навык иммерсионной микроскопии готового препарата.

Поставить малый сухой объектив на расстоянии 5-7 см от предметного столика и с помощью зеркала установить равномерное освещение поля зрения. После нанесения на поверхность препарата небольшой капли иммерсионного масла под контролем глаза сбоку погрузить в нее фронтальную линзу иммерсионного объектива, а затем, глядя в окуляр, при помощи винтов установить препарат в фокусе микроскопа. Микроскопирование необходимо проводить. Не снимая руки с винта, что дает возможность, изменяя фокусное расстояние, рассмотреть всю поверхность поля зрения. После работы иммерсионная система и столик микроскопа должны быть очищены от масла.