Выполнение работы на приборе «Квант»

Определение содержания рибофлавина проводят на приборе «Квант», внешний вид которого представлен на рисунке.

1 - включение прибора в сеть; 2 - чувствительность; 3 - измерение;

4 - переключа­тель установка 100 % грубо; 5 - установка 0 %;

6 - установка 100 % точно; 7 - отсчетный лимб;

8 - шкала отсчетного лимба; 9 - первичный фильтр; 10 - вторич­ный

светофильтр; 11 - кюветное от­деление; 12 - установка нуля;

Установка чувствительности; 14 - миллиамперметр

Рисунок - Внешний вид флуориметра «Квант»

Для проведения измерений на флуориметре «Квант» необходимо соблюдать следующий порядок.

Включить прибор в сеть переменного тока с напряжением 220 В и нажать кнопку 1 «сеть», при этом загорается индикаторная лампочка.

Дать прибору прогреться не менее 60 мин.

По спектрам поглощения и флуоресценции (экспериментальные или литературные данные) выбрать необходимые первичный и вторичный светофильтры. При установке светофильтра необходимо следить, чтобы зеркальная поверхность первичного светофильтра была обращена к источнику света, а вторичного - к кювете.

   

 

 

 

 

Лист    

 

 

 

 

изм Лист

№ докум

Подп.

Дата

При определении рибофлавина первый светофильтр синий (длина волны 440 нм), а второй светофильтр – зеленый (длина волны 520 нм).

4. Установить электрический нуль прибора, проделав следующие операции:

– перевести в левое положение ручку «0 %» до упора;

– вращением ручки «установка нуля» установить стрелку индикатора миллиамперметра на нуль.

5. Определить фон «холостого опыта» или растворителя и провести его компенсацию:

– установить в прибор кювету с растворителем («холостая проба»);

– нажать кнопку «Измерение» и вращением ручки отсчетного лимба установить стрелку индикатора на нуль (показания лимба будут соответствовать величине фона растворителя («холостого опыта»));

– установить на нуль шкалу отсчетного лимба «%», нажать кнопку «Измерение» и вращением ручки «установка 0 %» вывести стрелку индикатора на нуль. Фон растворителя будет скомпенсирован, и при дальнейших измерениях его можно не учитывать.

Внимание! При определении содержания рибофлавина «холостой пробой» является дистиллированная вода.

6. Заполнить кювету стандартным раствором. Нажать кнопку «Чувствительность» и вращением ручки «Установка чувствительности» добиться отклонения стрелки индикатора до деления 20 слева от 0. При этом надо следить, чтобы был выставлен 0 % на отсчетном лимбе и ручка «0 %» находилась в левом положении.

7. Не вынимая кювету с эталонным раствором, установить шкалу отсчетного лимба на деление 50 %. Нажать кнопку 1 переключателя «грубо», кнопку «Измерение» и вращением ручки «установка 100 % точно» установить стрелку индикатора на нуль. Если стрелка на нуль не устанавливается, включить кнопку 2 или 3 на переключателе «грубо», а затем нажать кнопку «Измерение» и ручкой «установка 100 % точно» добиться установки стрелки индикатора на нуль.

8. Определить интенсивность флуоресценции анализируемого раствора:

– установить в прибор кювету с анализируемым раствором;

– нажать на клавишу «Измерение» и вращением отсчетного лимба установить стрелку индикатора на нуль. Показания лимба будут соответствовать интенсивности светового потока флуоресценции исследуемого раствора в процентах.

Обработка результатов анализа

Содержание рибофлавина в одном драже (С) в граммах вычисляют по формуле

С = , г

где А - показания флуориметра при замере испытуемого раствора;

В – показания флуориметра при замере стандартного образца;