Физические и фармакологические способы защиты от окислительного стресса на модели гипобарической гипоксии у лабораторных мышей.

С целью предупреждения негативного влияния окислительного стресса на организм применяются препараты из групп антиоксидантов и антигипоксантов. Из литературы известно об эффективных сочетаниях средств системной энзимной терапии (СЭТ) с препаратами иных фармакологических групп, на которые СЭТ оказывала потенцирующее воздействие. Также представляло интерес изучение как наличия у препаратов СЭТ самостоятельной антиоксидантной активности, так и целесообразности их комбинации с антиоксидантами и антигипоксантами.

Опыты выполняли на мышах-самцах массой 18-22 г. Животных предварительно тестировали в «открытом поле». При формировании выборок следили, чтобы в разные группы попадали активные и неактивные особи в одинаковом соотношении. Было сформировано 9 равновеликих групп по 12 животных в каждой.

Первая группа лабораторных мышей составила контрольную выборку.

На второй группе мышей ежедневно на протяжении 2 недель моделировались условия гипобарической гипоксии: мыши-самцы помещались по 6 особей в эксикатор объемом 5,8 л. Два эксикатора подключались параллельно к насосу, создававшему за 5 минут давление в каждом из них равное 0,6 атм. После декомпрессии животные находились в гипобарических условиях на протяжении 30 минут, после чего осуществлялась компрессия до нормальных атмосферных условий за 1 минуту. 

На животных 3-ей – 7-ой групп также на протяжении 2 недель моделировались условия гипобарической гипоксии. Помимо этого им вводился назначенный препарат ежедневно за 30 минут до сеанса гипобарической гипоксии: животные 3-ей группы получали средство системной энзимной терапии Вобэнзим; 4-ой – антигипоксант Мексидол; 5-ой группы – поливитаминный препарат «Алфавит»; 6-ой группы – сочетание Мексидола и поливитаминного препарата «Алфавит»; 7-ой группы – сочетание Мексидола, поливитаминного препарата «Алфавит» и средства СЭТ Вобэнзим (таблица 25).

На мышах 8-ой группы на протяжении 2 недель моделировались условия гипобарической гипоксии, сразу после декомпрессии животные помещались в условия газовой смеси, состоящей на 98% из чистого кислорода и 2% азота. Газовая смесь указанного состава подавалась в эксикатор с животными в течение 10 минут под постоянным давлением 1,2 атмосферы, вывод излишков газа из камеры с животными осуществлялся через дополнительное отверстие в другой части эксикатора для обеспечения постоянного равномерного потока обогащенной кислородом газовой смеси в эксикаторе.

На животных 9-ой группы на протяжении 2 недель оценивалась эффективность разрабатываемого сочетанного способа воздействия – кислородотерапии и фармакотерапии. Им ежедневно вводили Мексидол, поливитаминный препарат «Алфавит» и средство системной энзимной терапии Вобэнзим за 30 минут до сеанса гипобарической гипоксии. Сразу после сеансов гипобарической гипоксии животные помещались на 10 минут в условия газовой смеси, состоящей на 98% из чистого кислорода и 2% азота. 

Таблица 25

Суточные дозировки исследуемых средств и способы из назначения

По окончании 2-недельного периода животные подвергались вскрытию под кетаминовым наркозом. Во 2-ой – 7-ой экспериментальной группах оно осуществлялось сразу после декомпрессии. В 8-ой и 9-ой группах – по окончании кислородотерапии. Кровь для последующего исследования отбиралась в количестве 3 мл из сосудов глазной ямки животного (таблица 26).

Содержание ТБКРС во всех экспериментальных группах было ниже, чем во 2-ой группе. Это свидетельствует об эффективности защиты. Лишь в экспериментальной группе № 3 оно не отличалось достоверно от группы № 2, животные которой не получали фармакологические препараты. Это свидетельствует об отсутствии антиоксидантных и антигипоксантных свойств у средства СЭТ Вобэнзим. Отмечено, что в исследуемых группах высокому содержанию ТБКРС соответствует низкая активность ГП.

Таблица 26

Показатели антиоксидантного статуса животных в конце исследования

По результатам монотерапии (группы 3–5) протективные свойства наиболее выражены при назначении Мексидола (минимальные значения ТБКРС, максимальные – ГП). Сочетанная терапия Мексидолом и поливитамином «Алфавит» (группа №6) не имела достоверных преимуществ перед монотерапией Мексидолом (группа № 4).

В экспериментальной группе № 7 показатели антиоксидантного статуса были еще лучше: на фоне сочетанного применения антигипоксанта Мексидола, поливитамина «Алфавит» и средства СЭТ Вобэнзим отмечены низкое содержание ТБКРС (p<0,05 при сравнении с предыдущей группой) и максимальная активность ГП (при сопоставлении с первыми шестью группами). Это указывает на потенцирующее влияние средства СЭТ Вобэнзим в отношении комбинации антиоксидантов и антигипоксантов. По полученным данным оформлена заявка на изобретение «Способ защиты от окислительного стресса» № a20131001.

В группе №8, получавшей только кислородотерапию, содержание ТБКРС было незначительно ниже, чем в группе №2, животные которой никак не были защищены от гипоксии. Это указывает на низкую эффективность монотерапии кислородом.

В группе животных №9 на фоне сочетания кислородотерапии и фармакотерапии отмечено минимальное содержание ТБКРС. То есть максимальный защитный эффект дает сочетанный способ профилактики и коррекции окислительного стресса, включающий фармакотерапию по разработанной схеме и кислородотерапию.