Методы исследования коагуляционного гемостаза, характеризующие

гиперкоагуляцию.

 

Гиперкоагуляцию можно определить следующими методами: АПТВ, ТВ, определение количества  Д-Димеров,  растворимых комплексов мономеров фибрина (РКМФ), продуктов деградации фибрина (ПДФ).

 

РКМФ (растворимые комплексы мономеров фибриногена/фибрина) образуются при действии тромбина на фибриноген, определяются в норме. Представляют собой фибрин-мономеры, состоящие из доменов Д---Е---Д с открытыми центрами полимеризации. Для образования из них фибрин-полимера необходимо накопление в крови достаточное их количество, до того они являются растворимыми комплексами фибрин-мономера. Определяются полуколичественно осадочными тестами: ортофенантралиновым, b - нафталановым и оцениваются в количестве плюсов по количеству и скорости выпадения хлопьев. Плазма не помутнела - результат отрицательный. Если плазма помутнела, есть сгустки - «++++».

Данный тест говорит о потенциальной тромбогенности плазмы и возможной гиперкоагуляции, о циркуляции в крови большого количества тромбина, тест подтверждает ДВС-синдром.

Тест не является строго специфичным, могут осаждаться другие белки, не имеющие отношение к гемостазу (парапротеины, С-реактивный белок).

 

ПДФ (продукты деградации фибриногена/фибрина) образуются в результате действия плазмина на фибриноген, фибрин-мономер и не сшитый поперечно фибрин-полимер. Представляют собой участки Д--- Е--- Д либо Д---Е с открытыми центрами полимеризации. Могут присоединяться к фибриногену, фибрину-мономеру, блокировать их и блокировать коагуляцию. Обладают ингибирующим влиянием на самосборку фибрина. 

Определяют их паракоагуляционными тестами. К плазме добавляют солянокислый ортрфенантролин (ОФТ), разъединяющий связи между ПДФ, происходит разблокировка центров полимеризации у фибриногена и высвободившийся фибриноген приводит к свертыванию крови (тест на ПДФ положительный). Если ПДФ нет, то добавление ортофенантралина не приводит к свертыванию крови – тест отрицательный.

Положительный тест указывает на наличие гиперплазминемии, на потенциальную тромбогенность плазмы, а также на возможное наличие тромбоза.

Продукты деградации фибрина относятся к поздним Д-димерам и в настоящее время определяются по тесту на содержание Д-димеров.

 

Д-Димеры. Уровень Д-димеров характеризует активность системы фибринолиза. При растворении поперечно сшитого фибрина с помощью плазмина образуются участки, состоящие из Д-Д и Д-Д-Е фрагментов соседних фибриновых нитей, т. к. плазмин разрезает продольные связи между Д---Е---Д доменами фибрина, но не действует на поперечную связь. Такие фрагменты получили название Д-димеры. 

Д-димеры определяют количественно с помощью тест-полосок иммунометрическим методом с использованием человеческих моноклональных антител к нео-антигену Д-димеров, не дающих перекрестные реакции с РКМФ и ПДФ. Для определения берется цитратная бестромбоцитарная плазма. Стабильность Д-димеров в цитратной плазме при комнатной температуре составляет 24 ч. после сбора материала. Норма содержания в крови составляет до 500 нг/мл. Тест высокочувствителен, но малоспецифичен. При уровне Д-димеров < 500 нг/мл (тест отрицателен) – вероятность тромбоза 60%, > 500 нг/мл - 98% -я вероятность наличия тромбоза. При нормально протекающей беременности в норме уровень Д-димеров в 2 раза выше.

Повышение уровня Д-димеров может наблюдаться при венозном тромбозе, тромбофлебите, тромбоэмболии легочной артерии, ДВС-синдром (все фазы), инфаркте миокарда, после оперативных вмешательств.

 

НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА В НОРМЕ

 

 

Показатели сосудисто-тромбоцитарного гемостаза

 

 

Манжеточная проба (проба со жгутом) Кончаловского-Румпеля-Лееде	норма                                < 10 петехий слабоположительная проба - 11 – 20 положительная                 - 21 – 30 резко положительная       > 30
Время кровотечения (ВК)	3-8,5 мин.
Содержание тромбоцитов в крови	150,0 – 450,0 х 109/л

 

Показатели коагуляционного гемостаза

 

 

Активированное парциальное тромбопластиновое время  (АПТВ)	25 – 38 сек.
Протромбиновое время (ПВ)	10 – 14 сек
Протромбиновый индекс (ПТИ)	70 – 110 %
Международное нормализованное отношение (МНО)	0,7 - 1,1
Тромбиновое время (ТВ)	15 – 18 сек

 

Показатели активности системы фибринолиза

 

Продукты деградации фибрина/фибриногена (ПДФ/Фг)	Тест отрицательный
Уровень Д-димеров	до 500 нг/мл