III.Изготовление микропрепаратов

Оптические свойстваклеток и тканей, которые препятствуют их прямому микроскопическому исследованию. Амплитудные и фазовые объекты.

Способы отбора проб в цитологии и гистологии. Физические и химические методы фиксации материала. Типы химических фиксаторов и механизмы их действия.

Методы изготовления цитологических и гистологических препаратов из фиксированного материала. Мазки, давленые препараты и срезы. Обезвоживание и заключение материала в консервирующие среды. Изготовление срезов.

Визуализация микроструктур с помощью красителей. Классификация красителей и механизмы их действия. Базофильные и оксифильные компоненты клеток и тканей. Импрегнация солями серебра.

Витальные красители. Цейтраферная съемка.

 

IV. Специальные методы световой микроскопии.

 

Методы повышения разрешающей способности. Ультрафиолетовая микроскопия. Рентгеновская микроскопия. Электронная микроскопия.

Методы повышения контраста. Метод темного поля и его применение в биологии. Поляризационная микроскопия. Фазово-контрастная микроскопия. Дифференциальный интерференционный контраст.

 

V. Флуоресцентная микроскопи я.

 

Физическая природа люминесценции, диаграмма Яблонского. Эпифлуоресцентная схема Брумберга и Крыловой. Фотофизические свойства и классификация флуорохромов.

Естественная флуоресценция микроструктур. Флуорохромы на ДНК, РНК, митохондрии и мембраны. Иммуноцитохимический метод. Флуоресцирующие белки. Квантовые точки.

Особенности приготовления препаратов для флуоресцентной микроскопии и их микрофотографии. Проблема выгорания флуорохромов.

Конфокальная микроскопия. Принцип конфокальности при получении оптических срезов. Схема сканирующего конфокального микроскопа. Примеры использования конфокальной микроскопии при решении задач цитологии и гистологии.

 

VI. Световая микроскопия высокого разрешения

 

Микроскопия дальнего поля. Понятие о функции рассеяния точки (PSF) и функции передачи контраста (OTF). Измерение разрешения цифровой микрофотографии. Предел Аббе и способы его преодоления. Сравнительный анализ методов управления PSF.

Микроскопия ближнего поля. Примеры использования микроскопии высокого разрешения в биологических исследованиях.

 

VII. Микрофотография и цитометрия

 

Устройство компьютерного микроскопа. Способы механического и оптического согласования фотоаппарата или телекамеры с микроскопом.

Принцип соответствия разрешающей способности объектива и параметров матрицы фотоаппарата. Основные характеристики и кодирование изображений в компьютере. Управление гистограммой яркости и другими характеристиками цифрового снимка.

Калибровка микроскопа. Измерение размеров, формы, ориентации, оптической плотности и других параметров микрообъектов на микрофотографиях. Макрофотогафия. Статистическая обработка данных.

 

УЧЕБНО-МЕТОДИЧЕСКАЯ КАРТА УЧЕБНОЙ ДИСЦИПЛИНЫ ДЛЯ ОЧНОЙ ФОРМЫ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ

Номер раздела, темы	Название раздела, темы	Количество аудиторных часов	Количество часов УСР	Форма контроля знаний
Лекции	Практические занятия	Семинарские занятия	Лабораторные занятия	Иное
I	Введение
1.1	Классификация и общая характеристика методов микроскопии							Проверка конспектов
II	Основы микроскопии
2.1	Принцип действия и устройство светового микроскопа							Проверка конспектов
2.2	Дифракционная теория микроскопа							Проверка конспектов
2.3	Разрешение и увеличение микроскопа. Настройка освещения микроскопа по Кёлеру							Оценка результата
III	Изготовление препаратов
3.1	Изготовление временных препаратов							Оценка результата
3.2	Исследование временных препаратов							Зарисовка в альбоме
3.3	Изготовление постоянных препаратов							Оценка результата
3.4	Исследование постоянных препаратов							Зарисовка в альбоме
IV	Специальные методы микроскопии
4.1	Методы повышения разрешающей способности							Тесты
4.2	Методы повышения контраста							Тесты
V	Флуоресцентная микроскопия
5.1	Квантовый механизм люминесценции. Эпифлуоресцентный микроскоп. Флуорохромы							Проверка конспекта. Выборочный опрос
5.2	Иммуноцитохимический метод исследования							Тесты
5.3.	Конфокальная микроскопия							Проверка конспектов
VI	Световая микроскопия высокого разрешения
6.1	Предел Аббе и методы управления PSF							Выборочный опрос
6.2	Микроскопия дальнего и ближнего поля							Проверка конспектов
VII	Микрофотография и цитометрия
7.1	Устройство компьютерного микроскопа							Выборочный опрос
7.2	Типовые задачи цитометрии							Оценка результата