Трактовка результатов при определении группы крови перекрестным способом.

Трактовка результатов производится по оценке и сопоставлению результатов, полученных при помощи стандартных сывороток и стандартных эритроцитов.

Результаты реакций, полученные при помощи стандартных сывороток и стандартных эритроцитов, должны совпадать, т. е. указывать на содержание агглютиногенов и агглютининов, соответствующих одной и той же группе крови. Эти результаты могут быть выражены в четырех различных комбинациях.

Реакция со стандартными сыворотками указывает на отсутст­вие групповых агглютиногенов, т. е. на принадлежность иссле­дуемой крови к группе 0(1). При этом сыворотка исследуемой крови (нижний ряд) дает отрицательную реакцию со стандарт­ными эритроцитами группы 0(1) и положительную с эритроци­тами групп A(1I) и В(Ш). Это указывает на наличие в исследуе­:мой крови агглютининов а и b и подтверждает принадлежность исследуемой крови к группе Оаb(1).

При помощи стандартных сывороток в исследуемой крови устанавливается наличие агглютиногена А. Сыворотка исследуе­мой крови (в нижнем ряду) дает отрицательную реакцию со стандартными эритроцитами групп 0(1) и A(1I), но положитель­ную с эритроцитами группы В(1II). Это указывает на наличие в сследуемой крови агглютинина b, т. е. подтверждает принад­kежность испытуемой крови к группе А_р(1I).

При помощи стандартных сывороток в исследуемой крови определяется наличие агглютиногена В. При этом сыворотка исследуемой крови (в нижнем ряду) дает отрицательную ре­акнию со стандартными эритроцитами групп 0(1) и В(1Н), но положительную с эритроuитами группы A(lI). Это указывает на наличие в исследуемой крови агглютинина а, т. е. подтверждает принадлежность испытуемой крови к группе Ba.

При помощи стандартных сывороток в исследуемой крови устанавливается наличие агглютиногенов А и В, а исследование контрольной сывороткой группы АВо(1V) подтверждает специ­фичность реакции. Сыворотка исследуемой крови (в нижнем ряду) дает отрицательную реакцию со стандартными эритроци­тами всех трех групп, что указывает на отсутствие агглютининов в исследуемой крови и подтверждает принадлежность испытуе­мой крови к группе ABo(IV)·

ОПРЕДЕЛЕНИЕ группы КРОВИ СИСТЕМЫ АВО с помощью моноклональных антител (ЦОЛИКЛОНОВ)

ЦОЛИКЛОНы анти-А, анти-В и анти-АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВО в прямых реак­циях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками.

Моноклональные анти-А и анти-В антитела продуцируются 2 мышиными гибридомами и принадлежат к IgM. ЦОЛИКЛОНы изготавливаются из ас­цитной жидкости мышей-носителей анти-А и анти-В гибридом.

ЦОЛИКЛОН анти-АВ-смесь МАТ (анти-А и анти-В).Технология изготовления реагента исключает возможность его контаминации патогенными для человека вирусами.

ЦОЛИКЛОНЫ выпускаются в жидкой форме во флаконах объемом 5-10 мл. ЦОЛИКЛОН анти-А красного цвета, анти-В - синего и анти-АВ бесцветный. В качестве консерванта применя­ется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения - 2 года при температуре 2-8 ос. Вскрытый флакон можно хранить в закрытом виде при температуре 2-8 ос в течение месяца.

Определение группы крови производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта, в том чис­ле из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на плоскости: на пластина или планшете. Определение группы кро­ви производится В помещении с хорошим освещением при тем­пературе 15-25 ос.

Ход исследования.

1. Нанесите на пластину ЦОЛИКЛОНы анти-А, анти-В и анти-АВ. по 0,1 мл под соответствующими надписями.

2. Рядом с каплями АТ нанесите по 1 маленькой каплее исследуемой крови (0,01-0,03 мл).

3. Смешайте кровь с реагентом индивидуальной сухой палочкой.

4. Наблюдайте за ходом реакции с ЦОЛИКЛОНами визуаль­но при легком покачивании в течение 3 мин. Агглютинация эритроцитов с ЦОЛИКЛОНами обычно наступает в первые 3-5 с, но наблюдение следует вести 3 мин более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны вооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютин­аты в ней не обнаруживаются.

Результаты реакции агглютинации исследуемой крови с ЦОЛИКЛОНами. Знаком(+) обозначается наличие агглютинации, знаком (-) отсутствие.

Если в 3 ячейках агглютинация отсутствует – 1 группа, напротив, наличие ее в 3 ячейках свидетельствует о 4 группе.